分离各种细胞器的方法有哪些
2022-11-10 10:38:03文/张哲细胞器的分离,一般采用差速离心法,此法是利用细胞各组分质量大小不同,在离心管不同区域沉降的原理,分离出所需组分,分离得到的细胞器,其纯度可采用电子显微镜法、免疫学法或测定标志酶活力法进行鉴定。(文章内容来源于网络,仅供参考)
分离各种细胞器的方法
1、分离各种细胞器常用的方法是差速离心法。在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。
2、密度梯度离心,用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。
细胞中的细胞器有哪些
线粒体,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,具有双层膜,线粒体又被称为‘动力车间’因为细胞生命活动所需要的能力95%都是来自线粒体。
叶绿体,是绿色植物叶肉细胞中进行光合作用的细胞器。
内质网,是由膜连接而成的网状结构,单层膜,是细胞内蛋白质加工,以及脂质合成的“车间”。可分为滑面内质网和粗面内质网,粗面内质网加工蛋白,滑面内质网合成脂质。真核动植物细胞中都含有内质网。
核糖体,无膜结构,分为附着核糖体和游离核糖体,将氨基酸合成蛋白质是由rRNA和核糖核蛋白构成的微小颗粒,是合成蛋白质的场所,所有细胞都含有核糖体。
高尔基体,与细胞分泌物的形成有关,主要是对蛋白质进行加工和转运,植物细胞分裂时,高尔基体与细胞壁的形成有关。
中心体是细胞中一种重要的无膜结构的细胞器,存在于动物及低等植物细胞中。每个中心体主要含有两个中心粒。它是细胞分裂时内部活动的中心。
溶酶体,溶酶体是由高尔基体断裂产生,单层膜包裹的小泡,数目可多可少,大小也不等,含有60多种能够水解多糖,磷脂,核酸和蛋白质的酸性酶,这些酶有的是水溶性的,有的则结合在膜上。
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